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浅谈分子生物学实验室设计要点_vns威尼斯城官网登入-厂威尼斯人

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浅谈分子生物学实验室设计要点
发布时间:2020-01-05 01:02:45浏览次数:73

在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解,以便因地制宜地利用现有房屋,或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限制生产,影响效率(efficiency)。
在设计实验室时,应按组织培养程序(procedure)来没计,避免某些环节倒排,引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件,需要一定的设备、器材和用具,同时还需要人工控制温度(temperature)、光照、湿度等培养条件。
实验室设计原则:保证无菌(意思:没有活菌)操作,达到工作方便,防止污染。
实验(experiment)室组成:化学实验室、洗涤(washing)菌室、无菌操作室(接种室)、培养室、细胞学实验室、其他小型仪器(appliance)设备。
1) 化学实验室(准备室):完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等。
主要设备:药品柜、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、天平、蒸馏(still)水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器。
2) 洗涤(washing)、灭菌室:完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。
主要设备:水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器(如烘箱)等。
3) 无菌(fungus)(意思:没有活菌)操作室(接种室):主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。
主要设备:紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械(接种镊子、剪刀、剖解刀、接种针)等。动物实验室在实验室内,为了获得有关生物学、医学等方面的新常识或解决具体问题而使用动物 进行的科学研究。动物实验必须由经过培训的、具备研究学位或专业技术能力的人员进行或在其引导下进行。
接种室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒。配置(deploy)拉动门,以减少开关门时的空气扰动。接种室要求干爽安静,清洁明亮。在适当位置吊装1~2盏紫外线(Ultraviolet rays)灭菌(fungus)灯,用以照射灭菌。最好安装一小型空调,使室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界空气对流。接种室应设有缓冲问,面积1m2为宜。进入无菌操作室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。
4) 培养室:培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。P3实验室生物安全防护三级实验室,简称P3实验室,P是Physical 的缩写。整个实验室完全密封,室内处于负压状态,从而使实验室内部的气体不会泄漏到外面而造成污染。培养室的大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空间和节省能源为原则。
分子生物学实验室设计
分子生物学实验室PCR
PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能(maybe)性,宜采用全送全排的气流组织形式。同时,要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。
1.试剂贮存和准备区:该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。 对与气流压力的控制(control),本区并没有严格的要求。
2.标本制备区:该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。 本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。
3. 扩增反应混合物配制和扩增区:该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增。此外,已制备的DNA模板和合成(说明:由几个部分合并成一个整体)的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中,通常在第一轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高的污染危险性,第二次加样必须在本区内进行。 本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。
4.扩增产物分析区:该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭分析仪器检测,此区域可不设。 本区是最主要的扩增产物污染来源,因此对本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。
5.完备的实验室配套设施:完备的实验室配套设施是保证实验工作的必要条件,应根据各个实验室实验网站内容的不同配备相应的设备和仪器(appliance),如超净工作台、生物安全柜、离心机、加样器等。化学实验室人们利用它们来探索学习物质及其变化的奥妙。进入化学实验室之前一定要仔细阅读实验室规则,严格按照规则操作。因为很多的化学药品对人体的危害性非常大,对环境也有较大污染。
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